Az ovulációs teszt a testben található luteinizáló hormon (LH) szintjét mérik. Egészséges működés esetén minden ciklus közepe táján megemelkedik az LH szint, kiváltva a peteérést, ezt nevezik LH csúcsnak. A luteinizáló hormont az agyalapi mirigy állítja elő, majd a véráram útján jut el a test minden pontjára, így többek között a vizeletbe is. Ez teszi lehetővé az LH szint otthon is elvégezhető, egyszerű mérését: az otthoni használatra szánt ovulációs tesztek többnyire a vizeletből mutatják ki az LH szintet. A vizeletből történő LH szint mérésére a reggeli első vizeletet általában nem szokták javasolni, a tesztet legjobb déltájban vagy a kora délutáni órákban elvégezni.
A ciklus első felében az LH szint 3-15 mIU/ml között mozog. LH csúcs idején az értéke 50 mIU/ml vagy még magasabbra is felszökhet, majd a ciklus második felében 5-10 mIU/ml-re esik vissza. Az ovulációs teszt azt mutatja meg, hogy a teszt érzékenységének megfelelő szintet eléri-e a vizelet ben az LH koncentráció.